乳酸菌發酵液體飼料對仔豬生長性能、糞樣菌群及血液生化指標的影響

2021-05-13 09:37:02 點擊：

摘要：試驗旨在研究乳酸菌發酵液體飼料對仔豬生長性能、糞樣菌群和血液生化指標的影響。選用體重相近的150頭體重20kg左右的三元雜交仔豬,對照組（Ⅰ組）飼喂基礎日糧，試驗組（Ⅱ組）飼喂含抗生素的基礎飼料日糧，試驗組(Ⅲ組)飼喂乳酸菌液體發酵飼料。結果表明，與對照組相比，飼喂乳酸菌發酵液體飼料仔豬的平均日增重和平均日采食量明顯增加(P<0.05)，顯著降低了仔豬的發病率(P<0.05)；鮮糞中大腸桿菌和沙門氏菌的數量顯著降低，乳酸菌的數量顯著增加(P<0.05)；顯著提高了血液中總蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G、葡萄糖的含量(P<0.05)，顯著降低了血液中尿素氮的含量(P<0.05)。

隨著人們生活水平的日益提高以及人們對食品安全、健康、環保等問題的關注度的提高,抗生素的濫用、殘留和耐藥性等關乎安全的關鍵問題重視度也明顯提高。自從禁止在動物飼料中添加抗生素以來，研究人員開始探尋其他可以替代抗生素的技術和產品，使畜牧業的生產不受到影響。在整個養豬過程中難度最大且復雜的環節是仔豬生長階段，此階段抗生素的使用呈普遍現象，雖然在國家各種政策的大力影響下有所改觀,但形勢仍然嚴峻。近年來,一些試驗研究發現，將飼料進行適當的處理及加工，可以在一定程度上降低仔豬對飼料及環境過敏的應激反應,進而減緩仔豬應激綜合癥，所以研發應用于仔豬的發酵飼料意義非凡。

發酵液體飼料（Fermented Liquid Feed, FLF）是一種環保、綠色的生物飼料，已經廣泛應用于歐洲等地，它有著與抗生素相同的作用，已經有試驗充分證明了FLF在仔豬上的優勢。經國內外研究者發現，飼料原料經過發酵后會有益生菌、酶、乳酸、代謝產物、維生素、蛋白質分解產物的產生，具有酸香氣味，適口性好，動物喜食，經乳酸菌發酵的飼料，大部分抗營養因子被消除，營養更加豐富，飼喂畜禽后可抑制腸道有害菌的生長，有效防止畜禽多種疾病的發生，維持動物腸道的菌群平衡進而改善動物生長性能的作用。在發酵過程中不添加抗生素，所以在動物體內不會造成抗生素藥物的殘留，研發FLF對我國畜牧業的發展意義重大。

目前，國內關于乳酸菌FLF在仔豬應用效果的研究報道還少之甚少，本研究主要是利用乳酸菌發酵液體飼料為研究對象，探究將FLF應用在仔豬階段飼喂后，仔豬的日采食量、日增重、料重比等生長性能改善情況，對腸道健康和對血液生化指標是否有改善作用，為乳酸菌FLF在生豬無抗養殖應用生產中替代抗生素提供試驗理論依據，為進一步研發安全、高效、環保的發酵飼料奠定了理論基礎。

材料和方法

1 試驗設計及基礎日糧

2019年5月5日~6月8日在信陽羅山縣鑫隆家庭農場養豬場進行了應用試驗，預試期5d，試驗期30d。選用體況良好的150頭約重20kg的“杜×長×大”健康仔豬，按要求隨機分為3組，每組5個重復。Ι組飼喂基礎日糧作為對照試驗，試驗Ⅱ組飼喂基礎飼料日糧添加5%金霉素的預混劑，試驗Ⅲ組飼喂乳酸菌FLF。平均每舍飼喂試驗豬10頭，每天定時對豬舍通風換氣，溫度為15~20℃，日常定時打掃豬舍2次，其他日常管理按常規進行。基礎日糧組成及營養水平見表1。

2 發酵飼料

2.1 試驗菌種

植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）UR-3是由河南省科學院生物研究所有限責任公司通過紫外誘變得來，現保存于中國微生物菌種保藏中心。

2.2 乳酸菌發酵液體飼料生產工藝

試驗過程中，河南省科學院生物研究所有限責任公司提供本研究所用的FLF，主要使用30kg桶裝式進行液體發酵，主要提供于養殖場和應用試驗的研究。發酵過程中所用的桶自帶排氣閥，密封性好,可保質一個月。乳酸菌FLF是將基礎日糧中的玉米：豆粕和麩皮水都按1：2的比例放入發酵桶中進行發酵，每桶總質量30kg，接入UR-3種子液1800ml，常溫發酵48~72h，飼喂前每桶按基礎日糧配方干物質的量添加4%的仔豬預混料，最后制成Ⅲ組的飼喂日糧。發酵前后，乳酸菌發酵液體飼料營養成分變化顯著，粗蛋白、生物量和乳酸含量都顯著高于尚未發酵的發酵液體飼料，具體營養成分價值分析參照參考文獻，此乳酸菌FLF的pH值≤4.0，且有濃郁的酸香味時即可飼喂。

3 生長性能的測定

分別在試驗階段的第0d和第30d的清晨，將試驗仔豬逐頭空腹稱重，以每重復組為單位，記錄體重，計算飼喂期間仔豬的平均日增重（ADG）。

每天記錄每個豬圈的投料量和飼喂結束的剩余量得到總的采食量，計算試驗期間仔豬的平均日采食量（ADFI）和料重比(F/G)。

4 糞樣菌群

4.1 樣品采集

在試驗進行的第20d和第30d清晨，每個重復隨機選2頭健康仔豬，采集其新鮮無污染微生物糞便，放冰箱-20℃待測。

4.2 糞樣的稀釋

在無菌條件下，稱取1g糞樣放入加有9ml磷酸鹽緩沖液的試管內，放玻璃珠進行震蕩使糞便均質化，振蕩器中振蕩5min后制成10-1稀釋液，隨后將此稀釋液加入放有9ml無菌磷酸鹽緩沖液的試管中制成10-2稀釋液，再次在振蕩器中振蕩5min，依此分別進行10-3~10-6倍的稀釋液的制備。

4.3 培養及菌落計數

大腸桿菌：在EMB固體培養基上接入糞樣稀釋液，37℃、24h培養后分別進行生理生化鑒定和平板計數。沙門氏菌：在SS固體培養基上接入糞樣稀釋液，37℃、24h有氧培養后進行平板計數。乳酸菌：在MRS固體培養基上接入糞樣稀釋液，37 ℃、48h厭氧培養后進行平板計數。

5 發病率

對仔豬的每日采食量、糞便質量、發病數量、死亡量、腹瀉情況、精神狀況和仔豬肛門污染狀況等進行密切觀察和記錄，包括仔豬出現感冒、發熱、關節腫痛、咳嗽、皮膚出現異常等常見病也要記錄在案。發病率(%)=總發病頭次數總頭數×試驗天數×100

6 血液生化指標

6.1 血清的制備

試驗完成的倒數第二天，將試驗仔豬禁飼12h，這期間自由飲水。隨機選1頭健康接近平均體重的仔豬，頸靜脈采血，常溫靜置15min后進行血清的分離，用離心機4000r/min離心5min，保存于-20℃冰箱。

6.2血液生化指標測定

先解凍血清，再采用血液生化分析儀測定血清中的總膽固醇、三酰甘油、總蛋白、葡萄糖的等指標含量；用免疫透射比濁法測定血清中免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M的指標含量。

7 數據處理

用DPS軟件進行數據方差分析。

結果

1 乳酸菌FLF對仔豬生長性能的影響（見表2）

由表2可知，各組仔豬初始體重差異不顯著；但在試驗結束時，與對照組相比，Ⅱ組和Ⅲ組的末重明顯增加，分別提高了7.95%(P<0.05)和8.17%(P

2 乳酸菌FLF對仔豬糞樣菌群的影響（見表3）

從表3可知，與對照組相比，Ⅱ組和Ⅲ組糞樣中大腸桿菌的數量分別降低了45.10%(P<0.05)和46.46%(P<0.05)；沙門氏菌的數量分別降低了78.57%(P<0.05)和84.87%(P<0.05)；Ⅲ組的乳酸菌的數量顯著提高(P<0.05)。

3 乳酸菌FLF對仔豬發病率的影響（見表4）

如表4所示，試驗過程中無試驗豬死亡。與對照組相比，Ⅱ組和Ⅲ組的發病率分別顯著降低了68.36%(P<0.05)和71.35(P<0.05)，Ⅱ組與Ⅲ組之間的差異顯著(P<0.05)。

4 乳酸菌FLF對仔豬血液生化指標的影響(見表5)

由表5的血液生化指標可以得出，三組試驗血樣中總膽固醇、三酰甘油和免疫球蛋白M含量差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比，Ⅱ組和Ⅲ組血樣中總蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G指標明顯提高，差異顯著(P<0.05)，且Ⅱ組與Ⅲ組間差異顯著( P<0.05)。與對照組相比，Ⅱ組和Ⅲ組血樣中尿素氮含量明顯降低，差異顯著(P<0.05)，而且Ⅱ組與Ⅲ組間差異顯著(P<0.05)；Ⅱ組和Ⅲ組血樣中葡萄糖含量明顯提高，差異顯著(P<0.05)，且Ⅱ組與Ⅲ組間差異顯著(P<0.05)。

討論

從試驗測定的仔豬生長性能一系列指標如：平均日增重、平均日采食量、料重比以及發病率等來看，試驗Ⅲ組乳酸菌FLF的試驗效果最好，不但提高了仔豬平均日增重和平均日采食量，而且明顯降低了料肉比和發病率。把固體飼料制成液體飼料，可以分解、軟化固體飼料，減少了仔豬胃腸道刺激，這樣可以使仔豬對飼料原料中營養物質的消化和吸收速度加快，進一步提高了仔豬的采食量。

由于仔豬的食物由母乳轉為固態所造成的一系列應激反應，當飼喂仔豬液體飼糧后，可以有效降低并防止仔豬機能的紊亂，并保護了仔豬的胃腸道，降低腹瀉率，還能降低固體飼料粉末刺激仔豬呼吸道的幾率，從而降低動物的呼吸道發病率，進而提高成活率。但液體飼料也存在一些弊端，如液體飼料增加了環境濕度，豬場的衛生環境難度加大；另外料槽內余下的液態飼料易霉變，極易發生仔豬中毒或感染腹瀉，所以勤清掃飼槽是十分有必要的。

FLF作為新型的綠色飼料，比固體飼料或一般的液體飼料更具明顯的優勢，雖然益生菌FLF還存在著質量不穩定，使用范圍小，使用效果不均一等方面的問題，而且當前FLF尚處在初期探索研究階段，也僅僅局限于斷奶仔豬應用階段，但我們有理由相信，隨著FLF加工設備的不斷發展，生產技術的不斷完善，只要解決了加工控制、菌種選擇和飼喂系統等問題，FLF必將是理想的抗生素促生長因子替代品。FLF的普及應用會進一步快速提高畜牧業的生產水平，為綠色畜產品的生產提供有力的支持。

綜上，本試驗結果可能與FLF產生作用效果的機理有關：經乳酸菌發酵的飼料，營養更豐富，含有豐富的乳酸菌及其代謝產物、乳菌素、小肽和維生素等，呈酸性，具有酸香氣味，適口性好，動物喜食，提高了動物的日采食量和日增重，從而提高仔豬的生長性能；飼喂畜禽后可抑制腸道有害菌的生長，乳酸菌數量大量增加，可以在動物腸道內大量定植，有效調整腸道菌群平衡，可分泌乳酸，并產生多種消化酶，幫助食物消化和代謝，促進營養質的吸收和利用，進一步增強了動物機體的免疫力，而且改善了仔豬的腸道健康并預防動物的腹瀉。

結論

本試驗表明，與對照相比飼喂乳酸菌FLF的仔豬的末重提高了8.17%，平均日增重提高了16.12%，平均日采食量提高了8.91%，料肉比降低了6.20%，同時也可以降低仔豬發病率,提高仔豬血液中總蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G、葡萄糖的含量，降低血液中尿素氮的含量。可見，FLF不僅可以使仔豬的應激反應減少、采食量增加，而且可以提高仔豬的生長速度和成活率，進而降低養殖成本。因此，FLF作為一種高效、綠色、生態和安全的飼料具有在各類養豬場推廣應用的潛力。

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